微生物的实验可以分为两大部分:前期准备和样品检验。
事实上,保持整个实验室清洁是非常重要的,这样就不用在灭菌前担心太多了,然而灭菌后必须保证样品或者培养基免受污染。其实,可以把灭菌想像成”一扇门”,在培养基中或者一些设备比如吸管的微生物都在灭菌过程中被杀死了,没有微生物困扰实验了。必须保证灭菌后的环境(门后的部分)的洁净,杜绝灭菌后的培养基和设备受到污染。
一、无菌的重要性
1、无菌技术——高压湿热灭菌
2、无菌技术——过滤 (Filtration)
3、无菌过程注意点
4、实验的无菌技术注意点
二、从微生物的实验室布局角度
一个设计合理的实验室能提供一个合格的环境以支持实验能够安全有效地进行。首先,需要为实验室选择一个合适的物理位置:
远离其他操作区域,比如,生产或者储运;
没有从其他区域进入实验室的直接入口;
实验室必须是微生物实验专用;
应有专门微生物检测无菌间,并通过缓冲间与准备间等进行区隔。
三、遵照GLP相关的安全规则
1.GLP要点——工作区域
2、GLP要点——洁净工作台
四、一个有效的实验室
五、微生物防护用具
1、一级防护(设备)
①移液辅助器,如移液器
②生物安全柜
③一次性塑料接种环、电热接种环
④螺口盖试管及瓶子
⑤高压灭菌器
⑥一次性塑料移液管
2、二级防护(人员)
①工作服、防护服
②手套(乳胶手套等)
③安全眼镜、面罩或其他防护用品
六、检测中常见问题解答
细菌和霉菌培养箱必须分开放置吗?
在CNAS-CL09:2013《检测和校准实验室能力认可准则在微生物检测领域的应用说明 》有此规定:5.3.3 e)检测样品中的霉菌时,要有适当的措施控制孢子在空气中的扩散。但未见到明确规定细菌培养箱和霉菌培养箱不能在同一房间的规定。一般实验室都有三种培养箱,结构设计上分为两种,一种是内部循环风温度平衡的,第二种是内外热空气流动自动平衡型的,另外第三种是热辐射温度平衡型的。有网友认为,第一种和第三种应该可以放在一个实验室,保持一定距离即可。第二种培养箱应该不能放在一个实验室。据说,CNAS现场评审,会提出细菌和霉菌培养箱分开放置要求。