一、拿样/取样

拿样：已有人取好样品，放在一个固定的地方，检测员每天上班后，拿好一个干净的密闭容器，去把样品拿回实验室，期间注意样品被污染。

取样：也叫抽样，需要自己去取/抽，去成品库取成品，去车间现场取半成品、接触面、非接触面、水、冰、内包袋、空气、辅料等。无菌取样，熟悉取样方法、流程，带好取样工器具，做好样品标识。取完样，放在干净密闭的容器，带回实验室，做好样品登记。

二、无菌室灭菌

一般采用紫外灯灭菌。实验室前、后打开紫外灯照射30分钟。注意实验前关灯后30min方可进入室内工作。很多人分不清无菌室和超净工作台的使用和区别，本人理解：无菌室是用来做样品前增菌的，超净工作台是用来做致病菌分离和特征/可疑菌落的进一步验证的。

三、配制培养基和相关试剂

现在用的干粉培养基较多，按照检测方法需要的培养基，买回来就行；用过的厂家有：北京陆桥、青岛海博和广州环凯。按照样品数量配制相应的培养基，也可以多配点，放着冷藏保存，有效期7天。干粉培养基保质期一般是3年，开封后1年，一年一瓶都用不了的，稀少。配制培养基的水，一般选择单蒸水。

培养基一般选择湿热灭菌法，称量好干粉培养基，加入相应的单蒸水，搅拌溶解后分装，塞上瓶塞或试管塞，用报纸或牛皮纸包扎好，橡皮筋捆好，放入高压灭菌锅。现在有些实验室是手提式灭菌锅，需要手动排气，人工计时，看压力表，比较累。   

培养皿和吸管：一般选择干热灭菌，可我工作过的几个实验室，干燥箱基本是用来干燥的（使用温度高容易坏，灭菌时间太久不想等待），也可以不用外校。培养皿和吸管包扎好后，放入高压灭菌锅灭菌。

培养基、培养皿、吸管等，灭好菌后，需冷却；然后通过传递窗搬进无菌室。

四、无菌室增菌

采样注意部位和代表性，一般采取可食部位。致病菌采样部位视具体样品而定。注意交叉污染。现在一般采用拍打式均质器。

五、做好标识

每个实验室标识最好是统一的做法，这样大家都能认识，把增菌好的试管和瓶子，通过传递窗拿到培养室放进相应的培养箱进行培养。

六、整理无菌室

做完实验，需要把无菌室整理好，工器具摆好位置，台面做好清洁卫生。打开紫外灯灭菌30分钟。

七、影响微生物检测结果的因素

1、 人 上岗培训，熟悉检测方法；

2、 机 仪器设备正常运行，定时维护保养；

3、 料 材料正确，有效；

4、 法 检测方法适合样品检测要求；

5、 环 环境满足微生物检测要求。

八、微生物检测的几点看法

1、资质证书：今年取消的食品检验工资格考试，而且每个省份，每个行业要求不一样，最好是边工作边考证。进入工作岗位，工作能力比证书重要。

2、熟悉检验方法，下载现行有效的版本，食品伙伴网提供免费下载。

3、25g称样量的波动范围，GB4789标准中没有明确，美国《微生物实验室指南》中提到：a.温度的波动范围是±1℃；b.重量和容量的波动范围是±1%；在该指南的第4.09章沙门氏菌检验中又指出：除特别规定，方法中所有指标的波动范围是±2%。据此推理，25g称样量的波动范围在±0.5g以内是合适的。

4、仪器计量  

温度、重量，压力等影响实验结果的仪器需要外校，同时实验室需要内校，温度用水银温度计内校，重量用标准砝码内校。一般外校的有效期是1年，高压灭菌锅的压力表是半年。

5、参加培训，多学习肯定是好的。

6、有条件的，每年至少参加一次外部能力验证，检验一下实验室的检测结果准确度，同时提升实验室的可信度，外部审核或客户验厂，都会问能力验证这块。如果有并且获得满意结果，回答时的底气都足些。